样品处理方式介绍--搅拌机的优缺点
搅拌机是早期用来做样品处理的发明之一,约于二次世界大战早期出现。此简单的装置是蛋白质纯化与分析物隔离的前期工作所使用的样品处理仪器。样品与萃取缓冲液一起放入搅拌机中,并搅拌。叶片会将*切,明显的减少组织的尺寸。
优点-搅拌机都是现成的,甚*家庭用的装置也可以用在实验室的样品处理使用上。他们可以快速的处理大量样品,而且操作简单。实验室的搅拌机可以使用不锈钢材质,可减少污染并进行**。远远低于超声破碎仪方式。
限制- 搅拌会产生涡旋,因此会造成发泡现象,导致明显的蛋白质变性。搅拌机是提供了均质,但不总是适合作为有效的萃取方法。目前的前沿研究工作更倾向于采用超声破碎仪方式来进行自己的样品处理。
进行样品前处理,搅拌机能有效的在**步骤减少样品尺寸,但从本图可看出搅拌机用于心脏组织,许多微纤维仍保持完整。
超声破碎法是一种利用空穴效应(cavitation)进行样品处理的过程。在sonication中,利用探头振福(amplitude)快速扩张与收缩所产生的空穴效应(cavitation)来进行样品处理。
一般来说对细胞悬浮液、微生物、动植物组织来说,超声破碎法应是*有效的均质法。由于气穴现象产生的巨大能量可在数秒内破坏大部分的细胞样品。是进行此类样品处理的*佳选择。
但是,这个方法也有很大的限制。当样品内含有小微粒时,超声破碎法是很有利的方法,例如细胞或预先均质过的组织。对较大块的固体组织来说(一般1mm以上),超声破碎法则是无效的方法。另外,超声波破碎法也会产生巨大的热能,会使蛋白质变性。这可利用短暂的冰浴来解决。
超声破碎法的产能也是个问题。若不需要考虑交叉污染的问题,则可以一次对多种样品使用单一探针。有多种探头可供选用,但样本与样本之间效果存在差异,需要谨慎的进行调研论证。北京星越生物科技有限公司作为branson sonifier 超声破碎仪的长期代理,积累了丰富的使用案例和实验方案,非常愿意为使用者提供相应的经验。对于新型应用,我们也很希望可以共同探讨,努力提供*好的解决方案。